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迷你垂直轉印電泳槽的操作步驟和維護保養方式

更新時(shí)間:2024-04-03      點(diǎn)擊次數:413
  迷你垂直轉印電泳槽是一種實(shí)驗室設備,主要用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中的蛋白質(zhì)或核酸的分離與分析。通常用于進(jìn)行SDS-PAGE(鈉十二烷基硫酸鹽-聚丙烯酰胺凝膠電泳)和WesternBlot(蛋白印跡)實(shí)驗。在進(jìn)行電泳時(shí),樣品被加載到具有微小孔隙的凝膠中。當電場(chǎng)施加到電泳槽中的電極時(shí),帶電的分子(如蛋白質(zhì)或DNA)會(huì )向相反電荷的電極移動(dòng)。由于凝膠的孔隙大小限制,不同大小或形狀的分子會(huì )以不同的速度移動(dòng),從而實(shí)現分離。

 

  在進(jìn)行轉印(即WesternBlot)時(shí),已分離的蛋白質(zhì)通常會(huì )從凝膠轉移到一種膜上(例如硝酸纖維素膜),此過(guò)程涉及電場(chǎng)和物理壓力,以促進(jìn)蛋白質(zhì)的轉移。
  迷你垂直轉印電泳槽的組成:
  1.電泳槽主體:通常由透明塑料或玻璃制成,便于觀(guān)察電泳過(guò)程。
  2.電極:分為陰極和陽(yáng)極,通電后產(chǎn)生電場(chǎng)使樣品在凝膠中遷移。
  3.緩沖液槽:存放電泳緩沖液,確保電流的均勻傳遞。
  4.樣品梳:用來(lái)形成樣品孔,以便加載待分析的樣品。
  5.電源供應器:提供穩定的電流和電壓以驅動(dòng)電泳過(guò)程。
  6.冷卻系統:防止電泳過(guò)程中產(chǎn)生的熱量導致設備過(guò)熱。
  操作步驟:
  1.準備凝膠:根據需要配制適當濃度的聚丙烯酰胺凝膠并裝入電泳槽。
  2.加入樣品:將預處理過(guò)的樣品加載到凝膠的樣品孔中。
  3.電泳:灌入適量的電泳緩沖液,連接電源,設置適當的電壓和電流開(kāi)始電泳。
  4.觀(guān)察分離:通過(guò)透明的電泳槽壁觀(guān)察樣品分離情況。
  5.完成電泳:當樣品達到理想分離狀態(tài)時(shí),關(guān)閉電源,取出凝膠。
  6.轉印(如果進(jìn)行WesternBlot):將凝膠上的蛋白質(zhì)轉印到膜上。
  7.染色與分析:對凝膠或膜進(jìn)行染色,以顯現蛋白質(zhì)條帶,并進(jìn)行后續分析。
  迷你垂直轉印電泳槽的維護保養:
  1.每次使用后需清潔電泳槽和其他配件,避免殘留物質(zhì)影響實(shí)驗結果。
  2.確保所有連接都正確無(wú)誤,避免因接觸不良造成電泳失敗。
  3.檢查電源供應器的性能是否穩定,必要時(shí)進(jìn)行校準。
  4.定期檢查冷卻系統是否正常工作,以防過(guò)熱影響實(shí)驗。
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