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熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統的各種光源選擇

更新時(shí)間:2016-12-16      點(diǎn)擊次數:2995
  熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統的各種光源,是其結構和功能的重要組成部分,但與CCD、鏡頭以及分析軟件相比,往往卻沒(méi)有得到應有的重視。我們經(jīng)常遇到這樣的用戶(hù),他們知道系統光源出現故障或整個(gè)系統報廢的時(shí)候都不知道凝膠成像透射紫外中有305nm與365nm兩種紫外燈管,或者搞不清他們之間有何區別。這其中固然有銷(xiāo)售商售后的不到位,但也反映出我們對熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統光源的不重視和缺乏足夠的了解,為此我們撰以此文,以期幫助用戶(hù)厘清他們的區別和各自的作用,讓您能夠更好的選擇購買(mǎi)、使用以及保養維護凝膠成像系統。
  根據應用的不同,往往不同型號凝膠成像產(chǎn)品配有差異性的光源,大致類(lèi)型可分為白光光源、紫外光源和高強度三色LED燈,其中白光和紫外光源又分別有透射(transilluminate)和反射(Epi)之分。
  下面我們對熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統的各種光源及其用途做簡(jiǎn)要介紹,首先是雙側反射白光光源,也是我們使用zui多的光源,通常作為系統照明光源使用,即放置或調整DNA膠或蛋白膠位置,或在對鏡頭調整聚焦時(shí)使用,當然在對非透明材質(zhì)的蛋白膠或其他成像物質(zhì)進(jìn)行成像時(shí)也需開(kāi)啟反射白光。
  其次透射白光,即通常所說(shuō)白光板,主要用于蛋白質(zhì)膠拍攝時(shí)使用,因為白光板位于透射紫外燈箱上方,所以為不影響透射紫外光源的使用,同時(shí)也更節約室內空間,白光板一般可以折疊豎立在箱體后部。
  透射紫外光源,即紫外透射燈箱,主要用于DNA膠拍攝,由于DNA常用的熒光染料是EB(即Ethidium bromide,溴化乙錠),而用標準302nm 紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號,可用帶CCD成像頭的熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統拍攝到,所以透射紫外的波長(cháng)通常是305nm段。
  目前,許多廠(chǎng)家設計了雙波長(cháng)的透射紫外燈管(302nm、365nm),其365nm光源主要適用于制備觀(guān)察以及切割條帶,減少對DNA的破壞,并減小對人的傷害。
  紫外反射燈源,一般為選配件,主要原因是其使用并不廣泛,只是在非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像才需要使用。往往比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠 與聚丙烯酰胺凝膠,透射光源*可以滿(mǎn)足,所以大部分廠(chǎng)家都只將紫外反射光源作為選配,只是在儀器上預留了位置與接口。
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