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熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統應用范圍分析

更新時(shí)間:2016-12-05      點(diǎn)擊次數:1981
   總體上來(lái)說(shuō)凝膠成像可應用于:熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析.
  (1)分子量定量
  對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線(xiàn),并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結果較肉眼觀(guān)察估計要準確很多。
  (2)密度定量
  一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個(gè)長(cháng)度片段的濃度。利用熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標準條帶進(jìn)行密度標定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
  (3)密度掃描
  在分子生物學(xué)和生物工程研究中,zui常用到的是對蛋白表達產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結合現在實(shí)驗室常規配備的掃描儀或者直接用白光照射的熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統就能完成此項工作。
  (4)PCR定量
  PCR定量主要是指,如果PCR實(shí)驗擴增出來(lái)的條帶不是一條,那么可以利用軟件計算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類(lèi)似,但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計算其占總和的百分數,密度掃描時(shí)并對選擇區域生成縱向掃描曲線(xiàn)圖并積分。
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